固相抗体芯片检测影响因素

固相抗体芯片检测，影响因素知多少？

想知道某一个样本中 mitogen-activated protein kinases（MAPKs）家族的多种蛋白磷酸化状态，或是想了解细胞受刺激后，释放了哪些细胞因子或趋化因子，但是同时检测多个蛋白样本量不足，无法进行多重 Western blot 或多重 ELISA？如果你还在为这样的问题而烦恼，那么一定还没有听说过固相抗体芯片。

Proteome ProfilerTM 固相抗体芯片可在一个样本中同时检测多种蛋白。避免了进行多重 Western Blot 实验的需要，且实验操作简单，无需特殊仪器。试剂盒中包含缓冲液、检测抗体和包被了高质量捕获抗体的硝酸纤维素膜，抗体点均以复点形式点喷在膜上。固相抗体芯片利用化学发光检测的方式，可按照传统 WB 的检测方式进行膜上蛋白的定量。部分抗体芯片也可同时应用在 LI-COR® 红外检测仪上。例如使用 ARY002B 固相抗体芯片，就可以迅速有效的检测出 MAPKs 和其他多种丝氨酸/苏氨酸激酶的磷酸化状态和相对含量。

 

ARY002B数据示例。HeLa human cervicalepithelial carcinoma cells were either untreated or exposed to 150 J/m2 of UVlight followed by a 30 minutes recovery period before lysis. Data shown arefrom a 2 minute exposure to X-ray film.

影响固相抗体芯片结果准确性的因素

1、抗体特异性

数据的准确性会因检测多重因子而受到干扰？众所周知，免疫学实验中，抗体特异性是影响实验结果的重要因素。R&D Systems 的 Proteome ProfilerTM 固相抗体芯片上所有抗体对均经过特异性筛选，保证每个蛋白检测的特异性，避免检测结果出现假阳性或者假阴性。我们使用作为金标准的 Quantikine ELISA 验证，R&D Systems 的抗体芯片结果与 ELISA 保持高度一致，保证检测结果的准确性，减少因实验结果错误而导致的白费劳动。

 

「-」检测结果阴性； 「+」检测结果阳性。

2、低背景

高背景干扰数据分析？R&D systems 的 Proteome ProfilerTM 固相抗体芯片除了使用高特异性的抗体之外，还应用了经过优化的缓冲液和可靠的化学发光反应系统。这些利器在保证了数据准确性的同时，也确保固相抗体芯片成像以后背景清晰无干扰。

 

 

3、无交叉反应

数据还可能因为交叉反应的干扰而无法有效解读。Proteome ProfilerTM 固相抗体芯片经过严格的筛查，排除了将容易出现交叉反应的因子（如受体与配体等）固定在同一张膜上而造成的交叉反应和数据无法解读的可能性。

 

 

综上，R&D Systems 经过严格的 QC，保证每一张芯片都具有高特异性、低背景和无交叉反应，让科研工作者获得的每个数据都是真实而有效的。

目前，我们提供以下 Proteome ProfilerTM 固相抗体芯片产品：
货号 种属 研究方向 检测指标数

货号	种属	研究方向	检测指标数
Ary001B	Human	Phospho-RTK	49
Ary002B	Human	Phospho-MAPK	24
Ary003B	Human	Phospho-Kinase	43
Ary004B	Human	Phospho-Immunoreceptor	59
Ary005B	Human	Cytokine	36
Ary006	Mouse	Cytokine	40
Ary007	Human	Angiogenesis	55
Ary008	Rat	Cytokine	29
Ary009	Human	Apoptosis	35
Ary010	Human	Pluripotent Stem Cell	15
Ary011	Human	sReceptor	105
Ary012	Human	sReceptor	119
Ary013	Mouse	Adipokine	38
Ary014	Mouse	Phospho-RTK	39
Ary015	Mouse	Angiogenesis	53
Ary016	Rat	Adipokine	30
Ary017	Human	Chemokine	31
Ary018	Human	Cell Stress	26
Ary019	Human	Kidney Biomarker	38
Ary020	Mouse	Chemokine	25
Ary021	Human	Protease	34
Ary022B	Human	XL Cytokine	105
Ary023	Human	Protease Inhibitor	32
Ary024	Human	Adipokine	58
Ary025	Human	Protease/Protease Inhibitor	34
Ary026	Human	XL Oncology	84
Ary027	Human	Ubiquitin	49
Ary028	Mouse	XL Cytokine	111
Ary029	Human	NFkB Pathway	41